使用土壤高速冷冻离心机的所有转头都具有转头自锁功能,能够轻松装卸,同时所有转头都能够高温高压灭菌,保障了使用者的安全性。
土壤高速冷冻离心机具体提取土壤DNA的步骤:
一、土壤样本预处理:
1、取500mg土壤样本至研磨管中。
2、加入980µL缓冲液,轻柔涡旋混匀。
3、加入120μL裂解液。
4、将研磨管置于研磨仪中,40Hz处理40sec。
5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒。
6、转移上清液至2mL离心管中。加入250μL去蛋白液,手动摇晃混匀。4℃放置5min。
7、12000rpm离心3min,之后取不多于900μL上清液,转移至2mL离心管中。
8、加入1/3体积的结合液,轻柔涡旋混匀。4℃放置5min。
9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5mL离心管中。
10、加入1.5倍体积的缓冲液,立即吹打混匀。
二、DNA提取:
1、将DNA吸附柱套入2mL收集管中,备用。
2、将预处理混合液加入到DNA吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液。
3、将DNA吸附柱放回收集管,加入600µL漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液。
4、重复一遍步骤3。
5、将DNA吸附柱放回收集管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液。
6、将DNA吸附柱放入新的洁净1.5mL离心管中,在滤膜中央加入30-100µL洗脱液,室温放置3min。然后12,000rpm离心1min,收集滤液即为样本DNA。
7、DNA样品可置于-20℃短期保存,-80℃长期保存。